HN6口腔鱗狀細胞癌細胞系

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。 
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
形態(tài)特性    上皮樣 
生長特性    貼壁生長
 培養(yǎng)條件    MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法    1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況   C5
凍存條件    基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　
支原體檢測    陰性　
STR    
同工酶
染色體

HN6口腔鱗狀細胞癌細胞系

以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術(shù)指導，請及時或郵件。
需要特別指出的是：如細胞出現(xiàn)問題，請于48h內(nèi)及時反饋，本公司將竭誠為您服務！

一．貼壁細胞  
客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。HEC-1-B-RFP熒光標記細胞株
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。 
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。 Hela人宮頸癌細胞
二．懸浮細胞   
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
三．一毫升小管操作方法  小管內(nèi)也是此細胞。 
1. 用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）。
2. 嚴格無菌操作，用吸管吸出管中細胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 
4.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO7  培養(yǎng)