SNU349人透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌

【細(xì)胞縮寫(xiě)】SNU349

    【細(xì)胞名稱(chēng)】SNU349(透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌)

    【背景資料】    見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)

    【細(xì)胞消化時(shí)注意把握消化時(shí)間，消化不夠會(huì)導(dǎo)致吹打細(xì)胞時(shí)造成損傷，一般消化時(shí)間是2-3分鐘，但以鏡檢時(shí)大部分細(xì)胞縮回球形為準(zhǔn)，一般2次即可將細(xì)胞吹打下來(lái)，消化不夠進(jìn)行細(xì)胞吹打易損傷細(xì)胞。細(xì)胞系的凍存液配方：90%FBS+10%DMSO，貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)】    細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系

    【代次】    P4

    【規(guī)格】    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

    【細(xì)胞數(shù)】    1*10（6）

    【生物安全級(jí)別】    1

    【生物體】    人

    【組織來(lái)源】    胃

    【細(xì)胞形態(tài)】    詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

    【細(xì)胞特性】    貼壁

    【特別注意：如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)，貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)，如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決】

SNU349人透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌

 發(fā)貨方式：
復(fù)蘇后發(fā)貨：我們復(fù)蘇細(xì)胞后發(fā)貨，貨期一周左右，免運(yùn)費(fèi)。（氣溫較好建議復(fù)蘇后發(fā)貨）
凍存發(fā)貨(干冰運(yùn)輸）：需額外增加干冰運(yùn)費(fèi)，選擇干冰運(yùn)輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細(xì)胞，為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管。（氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨）
細(xì)胞發(fā)貨采取專(zhuān)業(yè)的運(yùn)輸包裝，并選擇最快捷的運(yùn)輸方式（順豐速運(yùn)或其他空運(yùn)快遞）

細(xì)胞處理方法：
一、貼壁細(xì)胞
1、 接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開(kāi)外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時(shí)。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基，到50ml離心管中，剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代，如沒(méi)有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞，對(duì)50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞，如果細(xì)胞連片狀態(tài)，棄掉上清對(duì)收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養(yǎng)。

二、懸浮細(xì)胞
1、接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開(kāi)外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5、1000rpm，5min 離心，用吸管小心吸出上清，加入培養(yǎng)基，重懸細(xì)胞。
6、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細(xì)胞）。