T47D人乳腺癌細胞

復蘇細胞注意事項：

1收到細胞后當天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基，放進培養(yǎng)箱，第二天再消化。
2邊觀察邊消化，根據(jù)細胞的形態(tài)，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣，如可吹打下來，即終止消化?？蛻裘鞅容^好的消化時間。
3隨細胞有一份細胞操作說明書，請客戶仔細查看。
4記得加1%雙抗，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種，以備后用。
5售后時間為一周，僅限于細胞本身的質量問題，而因乙方自己不當操作（不規(guī)范操作，消化過度，不加雙抗導致的污染等）導致的細胞問題不在售后范疇。
6收到細胞后，如細胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問題，煩請當天盡快，以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請您務必重視。
7剛收到細胞時，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天，利于細胞盡快恢復狀態(tài)，細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，再調回10%即可。
（其中1,2條針對于貼壁細胞，懸浮細胞詳情請見細胞操作說明書）

T47D人乳腺癌細胞

細胞處理方法：

一、貼壁細胞
1、 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基，到50ml離心管中，剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代，如沒有達到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細胞，對50ml上清進行離心收集細胞，如果細胞連片狀態(tài)，棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化（1ml胰酶37度），接種培養(yǎng)。

二、懸浮細胞
1、接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規(guī)范，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5、1000rpm，5min 離心，用吸管小心吸出上清，加入培養(yǎng)基，重懸細胞。
6、將重懸好的細胞轉入六孔板或者細胞培養(yǎng)瓶種，加入新鮮培養(yǎng)基，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)（大部分細胞）。