L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞

細(xì)胞生長：懸浮

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞數(shù)量：1×106個(gè)

細(xì)胞傳代：1:3傳代,2-3天傳一代

細(xì)胞純度：92.2％

細(xì)胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

細(xì)胞凍存：液氮凍存（*培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）

細(xì)胞運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸（1 Vial）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25 flasks）

細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療

L-540 Hodgkin【人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞】培養(yǎng)條件

1640,90%；**胎牛血清，10%

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%

溫度：37攝氏度

傳代方法

顯微鏡下觀察細(xì)胞，當(dāng)覆蓋80%底面積時(shí)，進(jìn)行細(xì)胞傳代。注意不要等到細(xì)胞覆蓋100%的時(shí)候才傳代，那樣細(xì)胞容易老化。在生物安全柜或者超凈臺中，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細(xì)胞，加入5ml培養(yǎng)基，吹打均勻后，轉(zhuǎn)移到15ml離心管中，1000rpm 離心5分鐘離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按照1:3的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。

傳代密度均勻，有以下幾點(diǎn)比較重要：

1.盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時(shí)間。我見過有些剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的師弟師妹，一上來就加1-2ml胰酶，結(jié)果細(xì)胞團(tuán)大片脫落，雖然有后續(xù)吹打步驟，但我覺得效果不佳。至于難消化的細(xì)胞，怎么掌握分寸，還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。

2.在以上基礎(chǔ)上，我覺得細(xì)胞吹勻，這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細(xì)胞至離心管，加入培養(yǎng)液重懸混勻，吸管緩慢吹打20-30次，可配合水平搖晃離心管。

3.此外我覺得培養(yǎng)液的量可能也會有講究，如6孔板中你*終加入2ml細(xì)胞懸液，尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿，液體表面有張力，細(xì)胞易于聚集在中間，所以我一般6孔板再加1ml以消除影響，吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。

傳代方法：1:3-1:8傳代，每周換液2次。
細(xì)胞簡稱：COLO 205(COLO205)細(xì)胞
細(xì)胞名稱：COLO 205(COLO205)；人結(jié)腸癌細(xì)胞
組織來源：結(jié)直腸腺癌，腹水轉(zhuǎn)移
規(guī)    格：T25培養(yǎng)瓶，1×106cells
形態(tài)特征：貼壁/懸浮混合；上皮細(xì)胞樣
生長特性：貼壁/懸浮混合
培養(yǎng)條件：RPMI-1640+10% FBS
傳代方法：1:3-1:8傳代，每周換液2次。
背景：該細(xì)胞系是1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水中分離的，該病人在取腹水樣品前已用5-氟尿嘧啶治療4-6周，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
細(xì)胞簡稱：MRC-5(MRC5)細(xì)胞
細(xì)胞名稱：MRC-5(MRC5)；人胚肺細(xì)胞
組織來源：肺
規(guī)    格：T25培養(yǎng)瓶，1×106cells

L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞

其他熱銷產(chǎn)品：

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SK-MES 人肺鱗癌細(xì)胞株 DMEM

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SK-N-BE(2) 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株

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SK-OV-3 人卵巢癌細(xì)胞株

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SMMC-7721 人肝癌細(xì)胞株 DMEM

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SUP-B15 人Ph+急淋白血病細(xì)胞系 IMDM